Совершенствование биотехники воспроизводства и выращивания ценных промысловых и редких экзотических рыб привело к внедрению в практику рыборазведения интенсивных методов, основанных на:
— гормонотерапии — искусственной стимуляции созревания производителей гормональными и другими препаратами сходного действия с дальнейшим получением от них полноценных половых продуктов;
— заводском (массовом) методе инкубации оплодотворенной икры в специальных инкубационных аппаратах;
— подращивании молоди и выращивании товарной рыбы в аквасистемах различных масштабов и конструкций с замкнутым циклом регенерации воды.
Наибольшую актуальность на современном этапе приобретают методы получения зрелых продуктов от рыб, по тем или иным причинам (недостаточная изученность среды их обитания, физиологических нарушений, стрессов и т. д.) не созревающих естественным образом. Методика дополнительного гормонального воздействия на таких незрелых производителей позволяет решить эту непростую задачу. Кроме того, гормональная стимуляция значительно облегчает проведение акклиматизационных и племенных работ в промышленном рыбоводстве, гибридизацию рыб, помогает понять механизм нереста малоизученных видов, определить инкубационный период развития, плодовитость, получить исчерпывающие сведения об эмбриогенезе, поведении молоди и др.
В организме рыб естественный процесс перехода в нерестовое состояние осуществляется в результате воздействия на половые железы и половые клетки гонадотропного гормона, вырабатываемого в гипофизе и отчасти в эпифизе. Собственно половые гормоны вырабатываются интерстециальной тканью гонад. Под влиянием экологических факторов внешней среды (включая климатические, гидрохимические, гидрологические и т. п.), которые можно объединить термином «нерестовая обстановка», в организме рыбы происходит целый ряд сложных преобразований. В половых железах завершаются последние этапы созревания половых клеток, а сама рыба переходит в нерестовое состояние и приступает к размножению. Гонадотропный гормон гипофиза действует не прямо на ооциты, а на фолликулярные клетки, побуждая последние к выработке веществ, которые стимулируют созревание и овуляцию ооцитов.
Гибриды экзотических рыб:
Гибрид серпаса (Hyphessobrycon callistus serрае) и красноточечного орнатуса (Н. erythrostigma)
Гибрид медной рыбки (Hasemania nana) и инпаихта Керра (Inpaichthys kerri)
Гибрид высокоплавничной пецилии (Poecilia velifera) и гуппи (P. reticulata)
Гибрид восьмиполосой (Cichlasoma octofasciatum) и бриллиантовой (С. cyanoguttatum) цихлазом
Гибрид золотого леопарда (Cyrtocara venusta) и голубого дельфина (С. moorii)
Гибрид юлидохрома Регана (Julidochromis regani) и принцессы Бурунди (Neolamprologus brichardi)
Вызвать описанную цепь реакций в нужные сроки как раз призвана гормонотерапия. Наибольшее распространение получила методика гипофизарных инъекций. Благодаря тому, что и в природных условиях, и при искусственной стимуляции на созревание рыб действует одно и то же вещество, использование гипофизарных инъекций не вызывает нарушений в ходе созревания половых клеток у рыб. Гонадотропный гормон гипофиза, обладая очень узкой зоной воздействия, не вызывает патологических изменений в гонадах, не достигших определенной степени зрелости. При заготовке гипофизов следует руководствоваться следующими правилами:
1. Лучше всего для заготовки гипофизов использовать живую рыбу (в крайнем случае пролежавшую в тени на воздухе не более 3 ч). Возможно применение гипофизов также от замороженной океанической рыбы.
2. Нельзя проводить заготовку гипофизов от неполовозрелых или старых рыб, а также от рыб сразу после нереста.
3. Оптимальный период заготовки гипофизов в природе — преднерестовая концентрация рыб.
4. Ввиду того что таксономическая специфичность гонадотропного гормона гипофиза требует дальнейшего изучения, собирать гипофизы следует в отдельные емкости строго по семействам, а лучше по видам.
Извлеченные гипофизы трехкратно обрабатывают химически чистым ацетоном: 1 ч, 12 ч, 8 ч. Возможна и двукратная обработка (10 ч и 8 ч). На один объем гипофизов приходится 10 объемов ацетона, после чего гипофизы высушивают при комнатной температуре в тени на фильтровальной бумаге. Хранить гипофизы следует переложенными ватой в герметически закрытой темной посуде. Недопустимо нахождение гипофизов на открытом воздухе при высокой влажности и на солнце. Некондиционные гипофизы имеют буроватые (кровяные, слизистые и т. д.) вкрапления, легко крошатся. Оптимальный цвет правильно приготовленных гипофизов сахарно-белый. Ацетонированные гипофизы пригодны к употреблению в течение 2 лет, чаще — одного сезона. Максимальный срок сохранности до б лет, но при этом физиологическая активность действующего начала просроченных гипофизов резко снижается.
Для инъекций в практической работе можно пользоваться также свежими гипофизами, растертыми до тонкой взвеси в физиологическом растворе химически чистой поваренной соли (6 г/л). Кроме того, есть данные о применении солевых и спиртовых экстрактов гипофизов. К суспензии гипофиза для дезинфекции полезно добавить леворин, полимиксин, мономицин (100 ед./мл) и др.
В зависимости от способа приготовления гипофиза и индивидуальности производителя стимуляцию рыб ведут дозами от 2 до 20 мг/кг массы рыб. Обычно производителям делают две инъекции: предварительную (1/2—1/5 часть от разрешающей) и разрешающую, с интервалом 6—24 ч. Самцам в отличие от самок бывает достаточно одной обработки половинным количеством гипофизарной суспензии, которая способна вызвать активный сперматогенез.
Ввиду неодинаковости действия гонадотропина гипофиза на рыб, из-за видовой специфичности, а также состояния инъецируемых особей (2—3-я стадия зрелости гонад) количество и кратность введения препарата могут варьировать. Быстрый успех гормональной стимуляции в значительной степени зависит от соблюдения сроков обработки рыб. Полноценное разнообразное кормление, создание комфортных условий содержания обеспечивают нормальную подготовку производителей. Благодаря ранним дробным (т. е. многократным обработкам мелкими дозами) гипофизарным инъекциям удается форсировать наступление половой зрелости. Например, мозамбикская тиляпия созревает уже в 4 месяца; эффективная доза — 0,5—1 мг на 100 г массы рыб.
Для инъекций рыбам чаше используют малоемкие шприцы (от 0,5 до 1 мл) и тонкие длинные иглы, так как последние меньше повреждают кожу и позволяют ввести суспензию глубже в ткань. (Можно использовать пневмоинъекторы типа «Пчелка».) Перед уколом инструмент тщательно стерилизуют 10 мин. Для инъекций выбирают следующие точки:
1. Мышцы спины в первой трети тела, выше боковой линии, но несколько ниже основания спинного плавника, на уровне первых лучей.
2. Брюшную полость, в районе брюшных плавников; отсутствие спазмы мышц позволяет усвоиться почти всей порции гормона, но технически этот укол сложнее. Иглу вводят под острым углом под чешую. Место укола после удаления иглы в первом случае (в мышцы спины), если возможно, зажимают пальцем во избежание вытекания суспензии и слегка массируют. Отверстие закупоривается слизью, вследствие чего гормон не вытекает, частично снимается мышечный спазм.
При инъекции недоброкачественного гипофиза, а также при передозировке препарата на теле рыб в месте укола образуется язва, которая, как правило, ведет к некротическим изменениям в тканях и гибели рыб.
В международной практике для ускорения процессов созревания рыб используют также следующие эндокринные препараты:
— сыворотка крови жеребых кобыл (СЖК). Действующим началом является глюкопротеид: доза 1500—300 м. ед. (международная единица) на 1 кг массы рыб;
— гравидан (стерилизованная моча беременных женщин): доза 10—50 м. ед. действующего вещества (пролана);
— лейкоцитарные вещества (пептон и др.) в комбинации с гипофизом: доза 0,5 мл 10%-ного раствора в брюшную полость:
— кломифенцитрат: доза 1—10 мкг на 1 кг массы рыб;
— гестагенные препараты (эугином, гестофорин, коэрвонум и др.): доза 0,5 мг на 1 кг массы рыб (в течение 5—12 дней);
— сульфат меди: 0,05—0,5%-ный водный раствор (двукратная обработка) или 0,5 мл на 1 кг массы рыб;
— метапирон: доза 1 мг на 1 кг массы рыб;
— синахорин (гонадотропный гормон): доза 2—3 тыс. м. ед. на 1 кг массы рыб (до 3 раз);
— кортикостерон: доза 53—225 мг на 1 кг массы рыб;
— ацетат меди: доза 50 мкг на 1 кг массы рыб (многократные внутримышечные инъекции);
— суспензия асфальта: доза 12,5 мкг на 1 кг массы рыб;
— радиоактивный фосфор (32Р) в виде препарата Н3Р04;
— хорионический гонадотропин или хориогонин: доза 50—100 м. ед. на 50 г массы рыб (многократные инъекции);
— комплексная инъекция: доза 2 мг гипофиза, 0,5—1 мг нитрата стрихнина, витаминов B1 (2—4 мг), С (5 мг), 0,5 мл 40%-ного раствора глюкозы на 1 кг массы рыб;
— ЛГ (лютеотропный гормон): доза 1—3,5 мг на 1 кг массы рыб;
— ФСГ (фолликулостимулирующий гормон): доза 0,5—1,5 мг на 1 кг массы рыб;
— люлибирин или гонадолибирин: доза 0,5—2,5 мг на 1 кг массы рыб;
— диригисдран, или рецептал: доза 25 мкг/кг;
— прогестерон: доза 1 мг на 1 кг массы рыб;
— кортизол: доза 65—225 мг на 1 кг массы рыб;
— крезацин (кремнийорганический стимулятор созревания рыб), добавление в воду (1—5 мг/л).
Гибридный барбус (Barbus arulius XX В. filamentosa)
Гибридная цихлазома (Cichlasoma nigrofasciatum X С. septemfasciatum)
Гибрид золотого меланохрома и стройного псевдотрофеуса (Melanochromis auratus XX Pseudotropheus elongatus)
Правильно подготовленным производителям в большинстве случаев достаточно двух инъекций с интервалом 6—24 ч; у хоплиас, прохилодов и астианаксов нерестовое поведение регистрируют после гипофизарной инъекции (0,5—2 шт. ацетонированных гипофизов на 1 экз.) через 5—7 ч.
Для созревания крупных рыб, находящихся на ранних стадиях развития гонад, следует проводить несколько (5—10) сеансов инъекций (50 м. ед.) через 48—72 ч.
При инкубации оплодотворенной икры (после отлова производителей) в нерестовом аквариуме необходимо строго поддерживать оптимальный световой, температурный и газовый режим воды (недопустимы скачки температуры и наличие обескислороженных зон). При разведении рыб очень важно, чтобы карбонатная жесткость не превышала один градус. В противном случае наблюдаются массовые уродства, водянка желточного мешка у личинок, большой отход икры и т. д.